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颗粒分析

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自动人口统计

如果图像没有太多单个颗粒相互接触,则可以进行自动颗粒计数。可以使用Multi-point Tool进行手动颗粒计数。

Segmentation,或区分对象与背景的能力,可能是一个难以处理的问题。然而,一旦完成此操作,就可以分析该对象。

/media/imaging/raw-threshold-watershed-analyzeparticles2.jpg

RAW Threshold Watershed “AnalyzeParticles”

###设置阈值

5.1.1.1 手动阈值

自动分析需要“二值”黑白图像颗粒。设置阈值范围来区分感兴趣的对象与背景。图像中值低于阈值的所有像素都将转换为黑色,所有值阈值的像素都将转换为白色,反亦之然。

/media/imaging/black-white-threshold.png

设置阈值的方法有多种。最简单地通过菜单§§2§§设置阈值。可以使用阈值设置。阈值范围内的像素显示为红色。当您对阈值设置感到满意时,可以点击应用。这将永久应用阈值设置并将转换为二进制。您有不同的选项来设置手动阈值。设置为默认的下拉菜单允许您在默认和其他15种阈值技术之间进行选择。设置为红色的下拉菜单允许您在白底红绝色方案、白底黑绝色方案或上下绝色方案之间进行选择。背景勘测框将与背景颜色背景前景色进行选择。您还可以选择选中的叠底直方图框以整个生成的直方图。

/media/imaging/color-thresholding-manual-threshold2.png

对于图像颜色,通过命令序列ImageAdjustThreshold设置阈值。 阈值方法选项允许您选择默认值超出阈值技术。 阈值颜色选项允许您选择红色、转换白色、黑色或黑白作为阈值颜色。 色彩空间选项允许您在HSB、RGB、Lab和YUV之间进行选择。阈值图像的背景变亮或变暗。可以通过命令§§5§§§将图像为二值图像。

自动阈值

您可以使用多种算法来计算阈值,而不会引入用户偏差。对其中40幅作品进行了评估:

doi:10.1117/1.1631315

斐济在菜单ImageAdjustColor Threshold…中提供了几个插件,用于自动计算图像阈值。其中包括大津阈值、最大熵阈值和混合建模阈值。有关斐济可用方法的完整列表,请参见本页顶部“内容”选项卡下“文档”部分中的“插件”部分。

Automatic thresholding 5.1.1.2

分水岭分离

可以使用菜单命令ImageType8-bit来分离二值图像中的重叠对象。

通过首先阈值将图像转换为二值图像。然后,黑色像素被替换为像素像素,其强度与距白色像素的距离变成正比。接近边缘的黑色像素比更中心的黑色像素更亮。黑色是区域的欧几里德距离图(E DM)。由此每个计算对象的中心。这些是黑色区域的最终像素点(UEP),这意味着它们与边缘每等距。然后这些点会扩大,直到它们接触到另一个黑色像素。这个交汇点是划定分水岭的地方。

分析粒子

要分析基底图像中的助剂,请使用菜单命令ImageAdjustThreshold。这将为您提供每个有关图像中助剂的信息。

/media/imaging/analyze-particles-screenshot.png

设置最小尺寸和最大像素区域尺寸以排除不需要的对象。还可以选择0.0到1.0之间的圆度值来帮助排除不需要的对象。选择显示:消耗以显示检测到的对象的选项的图像。 *下拉显示菜单还允许用户显示无、裸露、稀疏、遮蔽、统计遮蔽、新增和新增遮蔽。用户可以选择是否显示结果清除结果汇总添加到管理器备用边缘包括孔记录开始和/或原位显示*。 一旦为您感兴趣的对象确定了正确的阈值和颗粒尺寸范围,就可以通过插件或宏自动进行颗粒分析。

细胞核成分

该插件可以自动执行上面讨论的许多步骤。

Nucleus counter 1

  1. 输入要统计的尺寸范围
  2. 选择自动阈值方法。这可以是 当前Otsu最大熵混合建模k-means 等等。 当前使用手动设置的阈值,请参见不同。
  3. 执行背景校正。 4.使用平滑过滤器。
  4. 执行分水岭分离。
  5. 将标记添加到ROI管理器。 7.对总结说“是”。

可以根据轻松要求添加其他选项。

文本统计、面积和平均大小作为窗口返回,只需覆盖在原始图像的副本上。

Nucleus counter 2

手动统计

您可以使用内置的第Multi-point Tool手动菜单。

粒子追踪

粒子跟踪器 粒子跟踪器是一个 2D 特征点跟踪插件,用于自动检测和分析细胞生物学中视频分析记录的粒子食谱。 Sbalzarini 和 Koumoutsakos (2005[1]) 中描述了该算法。

TrackMate 使用菜单命令ProcessBinaryWatershed。该插件允许您对点状结构执行单个粒子跟踪。有关更深入的信息,请参阅TrackMate tutorial and explanation

手动跟踪 使用菜单命令AnalyzeAnalyze particles…。该工具允许您跟踪细胞的运动。